臭靈丹[Laggera Pterodonta(DC.)Benth.]為菊科六棱菊屬藥用植物，別名獅子草、臭葉子、六棱菊等，又有“靈丹草”之稱。在我國(guó)主產(chǎn)于云南省，是民族民間習(xí)用藥，藥源豐富，具有悠久的使用歷史和廣泛的藥用價(jià)值，被廣泛用于治療感冒、咽喉炎、支氣管炎、瘧疾等病癥。
第1章 臭靈丹的基源和栽培種植
1.1臭靈丹的植物基源
臭靈丹[LaggeraPterodonta(DC.)Benth.]別名獅子草、臭葉子、六棱菊、野辣煙、歸經(jīng)草、魚(yú)富有，始載于《滇南本草》，為菊科植物翼齒六棱菊的干燥地上部分¨。本屬植物約20多種，分布于非洲熱帶及亞洲東南部，我國(guó)有3種，分別為六棱菊、假六棱菊和翼齒六棱菊，廣布于云南、四川等地，為一年生或多年生草本植物，云南僅有六棱菊和翼齒六棱菊這兩種。在云南民間，臭靈丹作為抗菌消炎、清熱解毒的良藥，一直被用來(lái)防治感冒、咽喉炎、支氣管炎、瘧疾等；同時(shí)，也作為外敷藥用來(lái)治療疥瘡、腫毒、燒燙傷、毒蛇咬傷、跌打損傷等[2]。本品性寒、味苦[3]。夏秋采收，洗凈，鮮用或曬干。從《滇南本草》書(shū)中可知，管氏醫(yī)家長(zhǎng)期在云南行醫(yī)，他們吸收、發(fā)掘、應(yīng)用、提高了許多民族民間的醫(yī)藥經(jīng)驗(yàn)，如臭靈丹草以往民間外用居多，而管浚首先采用內(nèi)服治療傷風(fēng)感冒，其口訣是“四時(shí)傷風(fēng)熱咳痛，臭靈丹草水煎用，風(fēng)寒蔥姜發(fā)汗出，風(fēng)熱石膏顯神通。”據(jù)20世紀(jì)70年代記載，赤腳醫(yī)生曾用臭靈丹草的水煎液過(guò)濾后直接注入腮腺炎患者的皮下組織，消炎速度快且徹底[4]。在對(duì)臭靈丹草多次野外考察中發(fā)現(xiàn)，它白煞分布植株有闊葉和狹葉兩個(gè)生態(tài)型[5]。
臭靈丹在不同的民族有不同的叫法，阿呂族：郎呢（意澤）；白族：粗煙篩；傣族：牙郎艷（德傣）；娜油、臘溜、粘美丹（西傣）；德昂族：芒畢；景頗族：Dijvepjing;拉祜族：臭靈丹：佤族：RIBAEDU、阿堵；彝族：松那薄；壯族：奈痛（云南文山）[6]。每個(gè)民族的藥用炎癥又有所區(qū)別，阿呂族用于感冒、咽喉炎、支氣管炎、瘧疾；白族用全草，用于感冒、流感、中暑、口腔炎、扁桃體炎、咽喉炎、中耳炎、支氣管炎、瘧疾；外用瘡癤、腫毒、燒燙傷、毒蛇咬傷、跌打損傷、骨折；傣族（德傣）用于感冒、咽喉炎、支氣管炎、瘧疾；（西傣）用全草，用于傷風(fēng)感冒、咳嗽、百日咳、哮喘、腮腺炎、淋巴結(jié)炎；拉祜族用全草，用于咽喉炎、氣管炎、燙燒傷（外用）、惡瘡腫毒（外用）、牙齒痛；佤族用根、葉，用于腹部熱痛、尿黃、尿少、尿道感染、上呼吸道感染、扁桃體炎、咽喉炎；彝族用全草，用于胃寒食滯、脘腹冷痛、瘀血腫痛、癰瘍瘡癤；壯族用全草，用于風(fēng)熱感冒、咽喉腫痛、肺熱咳嗽、急性牙周炎、扁桃腺炎、中耳炎、腮腺炎[6]。
民族藥臭靈丹的歷史背景[7]：彝族草藥?kù)`丹草，只要有點(diǎn)土就能活，路邊田埂隨處可見(jiàn)，用來(lái)清咽利喉，倮管見(jiàn)效，似乎是生得賤的緣故，人們叫它“臭靈抗病毒植物藥臭靈丹”。《中藥大辭典》記載：“臭靈丹是民間用藥，為菊科植物，多年生草本，高0.2-2m，全體密被綠色頭狀腺毛，有強(qiáng)烈的特殊臭氣”。但據(jù)專家稱，其實(shí)這種草藥的氣味只是淡淡的，并不強(qiáng)烈，有些人還喜歡聞它。也許只是人們?cè)缫押皯T叫慣，已約定成俗。早在《滇南草經(jīng)》里就有臭靈丹的記載。《植物名實(shí)圖考》卷十一隰草類飛廉項(xiàng)下載：“余至滇，見(jiàn)土人習(xí)用治寒熱毒瘡，以臭靈丹為要藥，園圃中多有之，就而審視，乃飛廉也 《滇本草》雖別名臭靈丹，而主治與《本草》、《別錄》同而加詳 余既喜見(jiàn)諸醫(yī)所未見(jiàn)，又以此草本生河內(nèi)，乃中原棄而不用，邊陲種人藉手祛患，物固有屈于彼而伸于此者。”《滇南本草圖譜》謂：“《植物名實(shí)圖考》以草之飛廉，疑非是。本種在國(guó)內(nèi)產(chǎn)于滇省及西康，非若陶隱居所說(shuō)處處有之。”1977年版的《中國(guó)藥典》將該藥材收載其中，于是臭靈丹之名更為廣傳。
另外，臭靈丹有一定毒性。2015年版《中國(guó)藥典》中161種清熱解毒類中藥制劑處方中，涉及的含毒性中藥29種，其中臭靈丹草屬于有毒藥材11種中的一種[8]。
1.2臭靈丹的栽培種植
臭靈丹草屬于六棱屬植物，隸屬于菊科(Compositae)，亦稱六棱菊屬[9]，在鄉(xiāng)間的路邊房角、荒坡野地，常見(jiàn)一種野生植物：莖上長(zhǎng)著四條帶狀窄葉，使它的莖稈看起來(lái)像四棱形，在莖稈的葉腋間又長(zhǎng)出一些分枝，每到春天，枝頭就會(huì)開(kāi)著白色的小花，這種植物的葉呈橢圓形，葉面有一層油狀分泌物，有點(diǎn)沾手，觸摸后嗅到一股淡淡的臭味，所以叫臭靈丹[10]。
從氨基酸總量、必需氨基酸含量、必需氨基酸組成及配比、藥效氨基酸含量、必需氨基酸比值系數(shù)分綜合評(píng)價(jià)看，臭靈丹中蛋白質(zhì)具有很高的營(yíng)養(yǎng)保健價(jià)值[11]。目前，市場(chǎng)上銷售的臭靈丹草藥主要來(lái)白于野生資源，由于它療效確切，用量逐年增加，野生資源已經(jīng)不能滿足市場(chǎng)需求，因此，只有通過(guò)人工種植才能保護(hù)臭靈丹草野生資源，實(shí)現(xiàn)臭靈丹草的可持續(xù)利用。要進(jìn)行人工種植首先要解決種植繁育技術(shù)問(wèn)題，臭靈丹草主要通過(guò)種子進(jìn)行繁殖，其種子較小，干粒重僅為0.04-0.079，常因育苗方法不當(dāng)，導(dǎo)致出苗率低，無(wú)法滿足生產(chǎn)需求。
專利[12]發(fā)明的臭靈丹草的種植栽培技術(shù)可實(shí)現(xiàn)臭靈丹草藥的可持續(xù)利用。
1.2.1臭靈丹的栽培
1．準(zhǔn)備苗床
選擇土層深厚、土質(zhì)疏松、肥沃的砂壤土地塊作為育苗地，清除地中的雜質(zhì)、殘?jiān)慨�施用腐熟農(nóng)家肥1500-3000kg和市售，復(fù)合肥15-20kg，深翻30cm，并耙平土壤，按低墑高埂做苗床，苗床寬1.0-1.2cm，埂寬40cm．埂高6-10cm，床面上撒3cm厚直徑小于2mm的砂壤土，并整平。
2．種子處理
種子用35-40℃的溫水浸泡24h，濾去水后將其與濕潤(rùn)細(xì)砂按體積比1：10的比例混合均勻。
3．播種
播種前一天用水將苗床充分澆透，將處理好的種子，均勻撒播在苗床上，播后覆蓋1-3mm厚的細(xì)土，在苗床上蓋1-2cm厚的松針或碎草，澆透水，塔高為60cm的透明塑料薄膜拱棚。
4．苗期管理
播后根據(jù)苗床土壤墑適時(shí)澆水，保持苗床土壤潤(rùn)濕，雜草高1-2cm時(shí)及時(shí)拔除，出苗后揭去覆蓋的松針或碎草，苗出齊后拔除弱苗、病苗：當(dāng)有4-5片真葉時(shí)掀開(kāi)拱棚兩端薄膜進(jìn)行煉苗。煉苗6-8天后，揭去拱棚膜。
5．種苗移栽
靈丹草苗有6-8片真葉時(shí)選擇壯苗進(jìn)行大田移栽。
1.2.2組培[5]
考慮到外界環(huán)境難以控制，最終找到可以使臭靈丹外置生長(zhǎng)為臭靈丹組培苗的再生體系（見(jiàn)圖8-6）。
1．用到的培養(yǎng)基
(1)擴(kuò)繁培養(yǎng)基（每升）：MS+NAA(0.2mg/L)+3%葳糖+瓊脂7.59pH：6.0
(2)誘導(dǎo)愈傷培養(yǎng)基（每升）：MS+6-BA(2mg/L)+NAA(0.5mg/L)+3%蔗糖+瓊脂7.59pH:6.0
(3)分化培養(yǎng)基（每升）：MS+6-BA(4mg/L)+NAA(0.5mg/L)+3%蔗糖+瓊脂7.59pH:6.0
2．種子培育
每年的11月到12月，采集元謀縣的臭靈丹種子，將臭靈丹種子先鋪放在有潮濕濾紙的培養(yǎng)皿中催芽，培養(yǎng)皿放置在中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所植化室溫室的花盆中，溫度約在25-30℃，光照即為昆明6-7月的白然光照，給予充足的水分，待其生長(zhǎng)大概12周，臭靈丹約有10片功能葉時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
3．組培苗培育
用臭靈丹幼嫩莖尖頂端作為外植體，通過(guò)初代培養(yǎng)、繼代增殖、生根培養(yǎng)和快速擴(kuò)繁建立臭靈丹離體培養(yǎng)體系。從溫室采集的外植體，放置在實(shí)驗(yàn)室里用清水漂洗一小時(shí)；然后拿到組培室無(wú)菌操作臺(tái)上用75%(v/v)的酒精進(jìn)行表面消毒0.5min，再用無(wú)菌水漂洗3次；最后用0.1%(V/V)HgCl2進(jìn)行消毒，再用無(wú)菌水漂洗5次。然后，將這些表面消毒好的外植體切成1cm長(zhǎng)的小段，移植到初代培養(yǎng)基上，Murashinge-Skoog(MS)培養(yǎng)基+6-benzylaminopurine(6-BA)2.0mg/L+a-naphthlceticacid(NAA)0.5mg/L。培養(yǎng)基放置在25℃的黑暗環(huán)境下培養(yǎng)兩周，移植到繼代增殖培養(yǎng)基上：MS培養(yǎng)基+6-BA(4.0mg/L)+NAA(0.5mg/L)，25℃下光周期為每天16h的環(huán)境下培養(yǎng)3周。最后移植在生根培養(yǎng)基上：IMS培養(yǎng)基+6-BA(4mg/L)+NAA(O.2mg/L)進(jìn)行生根培養(yǎng)。25℃下光周期為每天16h的環(huán)境下培養(yǎng)6周，待其生根長(zhǎng)成組培苗。然后從臭靈丹組培苗上剪取含有腋芽的莖段，約2cm長(zhǎng)，移植到擴(kuò)繁培養(yǎng)基上進(jìn)行繁殖。25℃下光周期為每天16h的環(huán)境下培養(yǎng)6-8周，待其長(zhǎng)成6-8cm高的組培苗時(shí)可用來(lái)實(shí)驗(yàn)。
4．注意
所有的操作都要求在無(wú)菌環(huán)境下，所有的培養(yǎng)基都加入了瓊脂7.5g/L和蔗糖3.0g/L。用NaOH調(diào)節(jié)pH5.6-5.8，所有的培養(yǎng)基都在121℃和1.1kg/cm2壓力的高壓鍋中滅菌20min。
1.2.3臭靈丹對(duì)重金屬的富集
文獻(xiàn)13]通過(guò)采用火焰原子吸收法檢測(cè)了臭靈丹對(duì)重金屬Pb、Cu、Zn及Ni的富集含量，得出結(jié)論：臭靈丹生長(zhǎng)適應(yīng)能力強(qiáng)、畝產(chǎn)量高，臭靈丹葉對(duì)Pb富集系數(shù)及臭靈丹的莖對(duì)Ni的富集系數(shù)>1，臭靈丹對(duì)Pb、Cu、Ni、Zn的轉(zhuǎn)運(yùn)系數(shù)均>1。綜合分析，臭靈丹具有開(kāi)發(fā)為Pb、Ni污染的植物修復(fù)的主體植物的潛質(zhì)。土壤環(huán)境、氣候環(huán)境等因素對(duì)植物的富集特性有一定的影響，雖然臭靈丹對(duì)Pb、Cu、Ni、Zn圓種重金屬的富集系數(shù)的影響因素有待進(jìn)一步考察，但是總的來(lái)說(shuō)臭靈丹具有開(kāi)發(fā)為Pb、Ni污染的植物修復(fù)的主體植物的潛質(zhì)。
第2章 臭靈丹的生藥學(xué)鑒別
2.1植物形態(tài)特征與特性
臭靈丹，草本。莖直立，粗壯或細(xì)弱，上部分枝，高達(dá)1m，基部徑約5mm，具溝紋，疏被短柔毛或雜有腺體，或有時(shí)無(wú)毛，莖翅連續(xù)或有時(shí)間斷，寬不超過(guò)2mm，有不整齊的粗齒或細(xì)齒，節(jié)間長(zhǎng)1-3cm。中部葉倒卵形或倒卵狀橢圓形，稀橢網(wǎng)形，無(wú)柄，長(zhǎng)7-10cm，寬2-3.5cm，基部長(zhǎng)漸狹或漸狹，沿莖下延成莖翅，頂端短尖或鈍，兩面疏被柔毛和雜以腺體，中脈和7-10對(duì)側(cè)脈在下面稍凸起，網(wǎng)脈略明顯；上部葉小，倒卵形或長(zhǎng)圓形，長(zhǎng)2-3cm，寬5-10cm，頂端鈍或短尖，邊緣鋸齒較小。頭狀花序多數(shù)，徑約10mm，在莖枝頂端排列成總狀或近傘房狀的大型圓錐花序，花序梗長(zhǎng)約2cm，無(wú)翅，密被腺狀短柔毛；總苞近鐘形，長(zhǎng)約8mm;總苞片約7層，外層綠色或中部以上綠色，葉質(zhì)或基部之邊緣干膜質(zhì)，長(zhǎng)網(wǎng)形或長(zhǎng)網(wǎng)狀披針形，長(zhǎng)4~5mm，頂端短尖，背面被腺狀短柔毛，內(nèi)層上部有時(shí)紫紅色，干膜質(zhì)，線形，長(zhǎng)6~8mm，頂端漸尖，背面脊處被腺狀短柔毛或無(wú)毛，最內(nèi)層極狹，通常絲狀。雌花多數(shù)，花冠絲狀，長(zhǎng)約7mm，頂端有4-5小齒。兩性花約與雌花等長(zhǎng)，花冠管狀，向上漸擴(kuò)大，檐部通常5裂，裂片卯狀或卵狀漸尖，背面有乳頭狀突起。瘦果近紡錘形，有10棱，長(zhǎng)約10mm，被白色長(zhǎng)柔毛。冠毛白色，易脫落，長(zhǎng)約6mm。花期4~10月[1]。生于海拔200~2400m的山野、路旁、山坡、田梗上[2]。
在我國(guó)，臭靈丹主要產(chǎn)于云南的迪慶、西雙版納、昆明、大理、麗江、楚雄、思茅等地區(qū)[3]。四川、湖北西部、貴州及廣西西南部也有分布，生于空曠草地上或山谷疏林中，國(guó)外主要分布于印度、中南半島及非洲熱帶地區(qū)[1]。
2.2性狀鑒別
臭靈丹呈短節(jié)狀，莖圓形，直徑0.3~1cm;具5-8列不規(guī)則缺刻的翅：多分枝；有細(xì)縱紋，密被絨毛，表面呈灰綠色或紫棕色。質(zhì)硬而脆，折斷面黃白色或略帶綠色，髓部類白色，約占直徑。葉片多皺縮破碎或脫落，少有完整者，呈灰綠色，密被眾多絨毛。具有特殊的臭氣，味苦、辛。以色綠，葉多、氣濃者為佳[2]。
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