《分子生物學與檢驗技術(供檢驗技術專業用全國高職高專院校教材)》包括分子生物學概論和分子生物學常用檢驗技術兩大部分。基于前期對國內醫院、第三方醫學檢測中心的調研分析,借鑒歐美國家分子診斷領域的應用進展,第二篇的內容主要涉及聚合酶鏈擴增、核酸雜交等檢驗技術,以及單基因遺傳性疾病、病原性微生物和腫瘤個體化靶向治療有關的分子檢驗項目,并引入即將進入醫學檢驗領域的下一代測序技術等內容,以增加教材的實用性和新穎性。分子生物學檢驗技術雖然具有特異性好、靈敏度高和針對性強等優點,但存在技術門檻較高、操作復雜等特點。有別于分子生物學基礎研究的是,分子生物學檢驗需要一個完善的質量保證體系,以確保方法、試劑和操作規程的標準化和檢驗結果的一致性。因此,本教材第二篇還包含了分子生物學實驗室質量保證等方面的內容。
第一篇 分子生物學基本概論
第一章 緒論
第一節 分子生物學的興起與發展
一、分子生物學發展歷程及其主要的里程碑
二、臨床分子生物學檢驗技術的發展與進步
第二節 分子生物學檢驗技術的主要任務
一、分子生物學檢驗技術的理論基礎
二、分子生物學檢驗技術的分析對象
第三節 分子生物學檢驗技術的臨床應用前景
第二章 核酸和蛋白質的結構與功能
第一節 蛋白質的結構和功能
一、蛋白質的基本組成
二、蛋白質的結構
三、蛋白質的功能
第二節 核酸的結構與功能
第一篇 分子生物學基本概論
第一章 緒論
第一節 分子生物學的興起與發展
一、分子生物學發展歷程及其主要的里程碑
二、臨床分子生物學檢驗技術的發展與進步
第二節 分子生物學檢驗技術的主要任務
一、分子生物學檢驗技術的理論基礎
二、分子生物學檢驗技術的分析對象
第三節 分子生物學檢驗技術的臨床應用前景
第二章 核酸和蛋白質的結構與功能
第一節 蛋白質的結構和功能
一、蛋白質的基本組成
二、蛋白質的結構
三、蛋白質的功能
第二節 核酸的結構與功能
一、核酸的分類、分布與生物學功能
二、核酸的結構與功能
三、核酸的重要理化性質
第三節 現代遺傳中心法則
一、DNA的生物合成
二、RNA的生物合成
三、蛋白質的生物合成
第三章 基因與基因組學
第一節 基因與基因組的概念
一、基因的分子生物學定義
二、基因組
第二節 原核生物基因組
一、原核生物基因組一般特征
二、質粒
三、大腸桿菌基因組
第三節 真核生物基因組
一、真核生物基因組一般特征
二、細胞質基因組特征
第四節 病毒基因組
一、病毒基因組的特征
二、DNA病毒
三、RNA病毒
第四章 癌基因和抑癌基因
第一節 細胞周期與細胞凋亡
一、細胞周期及其控制點
二、細胞凋亡與調控
第二節 癌基因和抑癌基因
一、癌基因
二、抑癌基因
第三節 腫瘤的發生與相關檢驗
一、腫瘤的發生
二、腫瘤的相關檢驗
第二篇 分子生物學常用檢驗技術
第五章 核酸的分離與純化技術
第一節 核酸的分離與純化技術
一、標本
二、方法和試劑的選擇
三、技術路線
四、樣品鑒定與保存
第二節 DNA的分離與純化
一、基因組DNA的分離與純化
二、質粒DNA提取與純化
三、DNA片段回收
第三節 RNA的分離與純化
一、RNA提取的特殊要求
二、RNA的提取與純化
三、RNA評價與鑒定
第六章 PCR技術與DNA序列測定
第一節 聚合酶鏈反應
一、PCR的基本原理
二、PCR反應體系和反應條件
三、基于PCR的相關技術
四、實時熒光定量PCR技術在分子診斷中的主要應用
第二節 DNA序列測定
一、DNA序列測定
二、二代測序技術及其臨床應用
三、DNA序列測定的應用
第七章 核酸分子雜交技術
第一節 分子雜交的基本原理及主要類型
一、核酸分子雜交的基本原理
二、探針
三、分子雜交的類型及主要步驟
四、核酸分子雜交條件及優化
第二節 熒光原位雜交技術的臨床應用
一、FISH技術在產前診斷中的應用
二、FISH技術在惡性腫瘤的分子診斷中的應用
第八章 重組DNA技術
第一節 常用的工具酶
一、限制性核酸內切酶
二、DNA連接酶
三、其它常用的酶類
第二節 常用的載體
一、克隆載體
二、表達載體
三、穿梭載體
第三節 DNA重組的基本步驟
一、目的基因的獲取
二、目的基因和載體的酶切
三、目的DNA與載體的連接
四、重組DNA導入宿主細胞
五、重組子的篩選和鑒定
第四節 重組DNA技術的應用
一、DNA重組技術促進了人類對遺傳信息的認識
二、采用DNA重組技術生產藥物與疫苗
第九章 蛋白質分離技術
第一節 蛋白質的分離與純化
一、分離純化策略
二、樣品的前處理
三、低分辨率操作單元
四、高分辨率操作單元
五、蛋白質的分析鑒定
第二節 蛋白質工程
一、蛋白質工程及其應用
二、抗體工程
第十章 分子生物學檢驗技術的臨床應用
第一節 對病原微生物相關疾病的診斷
一、對病毒感染性疾病的診斷
二、對細菌感染性疾病的診斷
三、對其它病原生物感染性疾病的診斷
第二節 在人類基因組相關疾病診斷中的應用
一、對單基因病的診斷
二、在多基因病中的應用
第三節 在惡性腫瘤個體化治療方面的應用
一、惡性腫瘤常規化療相關的分子診斷一
二、惡性腫瘤靶向藥物有關的分子診斷
第四節 對移植配型和個體識別方面的應用
一、移植配型中的應用
二、個體識別方面的應用
第十一章 臨床PCR檢驗實驗室質最保證
第一節 臨床PCR檢驗標本的采集和質量控制
一、標本的類型
二、標本的采集
三、標本的運送
四、標本驗收、拒收
五、標本的預處理和保存
六、標本提取核酸的保存
第二節 臨床PCR檢驗的室內質量控制
一、測定前質量控制
二、測定中質量控制
三、測定后質量控制
四、室內質量控制的局限性
第三節 臨床PCR檢驗的室間質量控制
一、概念
二、條件
三、EQA的工作流程
四、實驗室評分方法
五、室間質量評價的局限性
附錄 實訓指導
實訓項目一 微量移液器的使用
實訓項目二 肝組織基因組DNA的抽提
實訓項目三 基因組DNA樣品的純度和濃度鑒定
實訓項目四 應用PCR—RFLP方法進行苯丙酮尿癥的分子檢驗-苯丙氨酸羥化酶(PAH)第11外顯子C1068A點突變的檢測
實訓項目五 結核分枝桿菌分子檢驗
實訓項目六 子宮頸HPV感染的分子檢驗
實訓項目七 慢性粒細胞白血病Abl基因突變檢驗
實訓項目八 總RNA分離和純化
實訓項目九 總RNA樣品的鑒定
實訓項目十 乳腺癌曲妥珠單抗(赫賽汀)靶向治療的分子檢驗
參考答案
中英文名詞對照索引
參考文獻