微生物學(xué)是實踐性很強的學(xué)科,微生物學(xué)實驗技術(shù)是該學(xué)科的重要內(nèi)容。趙斌等編著的《微生物學(xué)實驗(第2版)》由長期從事微生物教學(xué)、科研工作的教師編寫,總結(jié)了編者多年的實驗教學(xué)經(jīng)驗和科研成果。本書包括93個實驗,共分六大部分:①微生物的形態(tài)學(xué)研究方法,介紹微生物的制片、染色及形態(tài)觀察;②微生物的純培養(yǎng)技術(shù),介紹幾種常用培養(yǎng)基的配制、滅菌及微生物接種技術(shù); ③微生物的營養(yǎng)及環(huán)境條件,介紹微生物的培養(yǎng)及生長條件;④微生物的分離與純化,介紹微生物的分離、純化、形態(tài)鑒定、生理生化鑒定和分子鑒定操作技術(shù);⑤微生物育種技術(shù)與菌種保藏,介紹微生物的遺傳、育種、菌種保藏實驗操作方法;⑥應(yīng)用微生物實驗,包括不同環(huán)境中(土壤、水體、食品)微生物的檢測、微生物細(xì)胞的熒光標(biāo)記、酶活性檢測等研究技術(shù),培養(yǎng)學(xué)生的綜合實踐能力。
《微生物學(xué)實驗(第2版)》可作為高等院校生命科學(xué)、微生物學(xué)、生物技術(shù)、生物工程、資源環(huán)境及植物病理學(xué)等專業(yè)的教學(xué)用書,也可作為研究生和相關(guān)研究人員的參考書。
趙斌等編著的《微生物學(xué)實驗(第2版)》的內(nèi)容重點注重微生物學(xué)的基本實驗技術(shù),包括顯微鏡的使用技術(shù)、微生物形態(tài)觀察的制片染色技術(shù)、微生物細(xì)胞大小測定與計數(shù)技術(shù)和微生物的純培養(yǎng)技術(shù)、微生物的分離鑒定技術(shù)。本書內(nèi)容介紹了微生物的最新研究技術(shù),包括細(xì)菌的轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、原生質(zhì)體融合、質(zhì)粒快速檢測、DNA的PCR擴(kuò)增、發(fā)光酶基因標(biāo)記技術(shù)等。本書內(nèi)容兼顧了微生物的應(yīng)用技術(shù),包括酸乳制作、細(xì)胞固定化、食用菌栽培、根瘤菌和菌根應(yīng)用等。
第一部分 微生物的形態(tài)學(xué)研究方法Ⅰ 微生物的形態(tài)觀察一、細(xì)菌的形態(tài)觀察 實驗一普通光學(xué)顯微鏡的使用及活細(xì)菌觀察 實驗二細(xì)菌的簡單染色和革蘭氏染色 實驗 第一部分 微生物的形態(tài)學(xué)研究方法Ⅰ 微生物的形態(tài)觀察一、細(xì)菌的形態(tài)觀察 實驗一普通光學(xué)顯微鏡的使用及活細(xì)菌觀察 實驗二細(xì)菌的簡單染色和革蘭氏染色 實驗三細(xì)菌的莢膜染色 實驗四細(xì)菌的芽孢染色 實驗五細(xì)菌的鞭毛染色(附細(xì)菌的運動性觀察) 實驗六藍(lán)細(xì)菌的培養(yǎng)與觀察二、放線菌形態(tài)觀察 實驗七用玻璃紙瓊脂平板透析培養(yǎng)法觀察放線菌形態(tài) 實驗八用插片培養(yǎng)法觀察放線菌的形態(tài) 實驗九放線菌的印片染色法三、真菌的形態(tài)觀察 實驗十霉菌形態(tài)及無性孢子的觀察 實驗十一霉菌封閉標(biāo)本的制備 實驗十二霉菌接合孢子的培養(yǎng)與觀察 實驗十三酵母菌子囊孢子的培養(yǎng)與觀察 實驗十四傘菌擔(dān)子和擔(dān)孢子的壓片觀察 實驗十五鐮刀菌分生孢子的培養(yǎng)與觀察四、病毒的形態(tài)觀察 實驗十六昆蟲病毒多角體的染色與觀察 實驗十七噬菌斑的培養(yǎng)與觀察五、藻類和原生動物的形態(tài)觀察 實驗十八衣藻和水綿的形態(tài)觀察 實驗十九草履蟲和眼蟲的培養(yǎng)與觀察 實驗二十變形蟲的培養(yǎng)與觀察Ⅱ 微生物的大小與數(shù)量測定 實驗二十一微生物細(xì)胞大小的測定 實驗二十二微生物細(xì)胞的顯微直接計數(shù)法 實驗二十三稀釋平板測數(shù)法 實驗二十四稀釋培養(yǎng)計數(shù) 實驗二十五比濁法測定大腸桿菌的生長曲線 第二部分 微生物的純培養(yǎng)技術(shù)Ⅰ 培養(yǎng)基的制備一、培養(yǎng)基的配制方法二、幾種常用培養(yǎng)基的配制 實驗二十六牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的制備 實驗二十七高氏一號合成培養(yǎng)基的制備 實驗二十八馬丁一孟加拉紅培養(yǎng)基的制備 實驗二十九馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基的制備 實驗三十土壤浸出液培養(yǎng)基的制備 實驗三十一麥芽汁培養(yǎng)基和米曲汁培養(yǎng)基的制備 實驗三十二明膠培養(yǎng)基的制備 實驗三十三石蕊牛乳培養(yǎng)基的制備Ⅱ滅菌和消毒一、干熱滅菌法二、濕熱滅菌法三、過濾除菌四、紫外線殺菌五、化學(xué)藥劑消毒殺菌Ⅲ微生物接種技術(shù)一、接種前的準(zhǔn)備工作二、幾種常用的接種技術(shù) 第三部分 微生物的營養(yǎng)與環(huán)境條件 實驗三十四營養(yǎng)元素對微生物生長的影響 實驗三十五氧氣對微生物生長的影響 實驗三十六溫度對微生物生長的影響 實驗三十七pH對微生物生長的影響 實驗三十八紫外線殺菌實驗 實驗三十九化學(xué)藥劑對微生物的作用 實驗四十微生物的拮抗實驗 實驗四十一微生物的耐鹽性實驗 第四部分 微生物的分離與純化Ⅰ 微生物純培養(yǎng)分離純化的一般方法 實驗四十二土壤中好氣性細(xì)菌的分離與計數(shù)(附劃線分離法) 實驗四十三厭氧細(xì)菌的分離培養(yǎng) 實驗四十四土壤中纖維素分解菌的分離培養(yǎng) 實驗四十五土壤中的固氮菌的分離培養(yǎng) 實驗四十六豆科植物根瘤中根瘤菌的分離 實驗四十七死蟲中蘇云金芽孢桿菌的分離 實驗四十八土壤中有機(jī)磷農(nóng)藥降解菌的分離 實驗四十九土壤中放線菌的分離與計數(shù) 實驗五十土壤中真菌的分離與計數(shù) 實驗五十一酒曲中酵母菌的分離 實驗五十二擔(dān)子菌的彈射分離 實驗五十三土壤中叢枝菌根真菌的篩選分離 實驗五十四 自然環(huán)境中噬菌體的分離 實驗五十五土壤中藻類的分離 實驗五十六土壤中原生動物的分離Ⅱ 微生物的形態(tài)鑒定方法 實驗五十七各類微生物菌落的識別Ⅲ微生物的生理鑒定常規(guī)實驗 實驗五十八微生物對含碳化合物的分解和利用 唯一碳源實驗 糖、醇、糖苷類碳源的分解實驗 淀粉水解實驗 纖維素分解實驗 果膠分解實驗 油脂水解實驗 甲基紅(M.R.)實驗 乙酰甲基甲醇(V.P.)實驗 檸檬酸鹽實驗 實驗五十九微生物對含氮化合物的分解和利用 唯一氮源實驗(無機(jī)氮) 明膠液化實驗 石蕊牛乳實驗 產(chǎn)氨實驗 產(chǎn)硫化氫實驗 硝酸鹽還原實驗 吲哚實驗 實驗六十微生物的產(chǎn)酶實驗 過氧化氫酶實驗 苯丙氨酸脫氨酶實驗 卵磷脂酶實驗 實驗六十一利用BI0LOG系統(tǒng)進(jìn)行微生物的分類鑒定Ⅳ微生物的血清學(xué)鑒定 實驗六十二抗血清制備 實驗六十三直接凝集反應(yīng) 實驗六十四免疫電泳 實驗六十五雙向免疫擴(kuò)散V微生物的分子鑒定 實驗六十六細(xì)菌總DNA的提取 實驗六十七PCR擴(kuò)增細(xì)菌16SrRNA序列 實驗六十八細(xì)菌16SrRNA序列的克隆 第五部分 微生物育種技術(shù)和菌種保藏 實驗六十九三親本雜交 實驗七十細(xì)菌的專性轉(zhuǎn)導(dǎo) 實驗七十一細(xì)菌的轉(zhuǎn)座突變 實驗七十二細(xì)菌的互補測驗 實驗七十三大腸桿菌的中斷雜交實驗 實驗七十四紫外線誘變技術(shù)及營養(yǎng)缺陷型突變株的篩選 實驗七十五亞硝酸誘變技術(shù)及乳糖發(fā)酵突變株的篩選 實驗七十六原生質(zhì)體融合 實驗七十七脈孢菌的分離和交換 實驗七十八微生物菌種保藏 第六部分 應(yīng)用微生物實驗 實驗七十九豆科植物根瘤的固氮酶活性測定 實驗八十根瘤菌的熒光標(biāo)記及檢測 實驗八十一泡囊叢枝狀菌根的染色 實驗八十二蘇云金芽孢桿菌殺蟲劑的生物測定 實驗八十三 抗生素的效價測定(管碟法) 實驗八十四棉鈴蟲核多角體病毒的室內(nèi)培養(yǎng)及效價測定 實驗八十五乙醇發(fā)酵(附巴斯德效應(yīng)) 實驗八十六乳酸發(fā)酵 實驗八十七酸奶制作 實驗八十八水中細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群的檢測 實驗八十九食品中菌落總數(shù)和大腸菌群的檢測 實驗九十食品中沙門氏菌的檢測 實驗九十一環(huán)境微生物細(xì)胞的固定化技術(shù) 實驗九十二產(chǎn)蛋白酶和淀粉酶芽孢桿菌的分離和酶活力檢測 實驗九十三利用PCR-DGGE方法對土壤微生物群落多樣性的檢測主要參考文獻(xiàn)附錄一微生物實驗課常用玻璃器皿的清潔法附錄二教學(xué)常用菌種附錄三常用培養(yǎng)基配方附錄四常用染色液的配制附錄五緩沖液的配制附錄六常用試劑和指示劑的配制附錄七微生物混濁度計數(shù)法麥蘭云度計的配制與菌數(shù)對照表附錄八幾種法定單位的名稱與換算附錄九最大或然數(shù)統(tǒng)計表