《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教程/全國(guó)高等院校醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)規(guī)劃教材》包括醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)與醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)兩部分。醫(yī)學(xué)微生物學(xué)共八章,第一章到第五章為醫(yī)學(xué)微生物學(xué)總論實(shí)驗(yàn)部分,介紹了醫(yī)學(xué)微生物學(xué)常用技術(shù)、細(xì)菌的培養(yǎng)與保存方法、細(xì)菌的分布和代謝及影響因素、細(xì)菌的遺傳變異、細(xì)菌的致病作用。第六章到第八章為醫(yī)學(xué)微生物學(xué)各論實(shí)驗(yàn)部分,介紹了常見(jiàn)醫(yī)學(xué)微生物相關(guān)的實(shí)驗(yàn)方法。醫(yī)學(xué)免疫學(xué)部分介紹了免疫學(xué)常用技術(shù)、非特異性免疫功能檢測(cè)、特異性體液和細(xì)胞免疫功能測(cè)定,免疫病理反應(yīng)!夺t(yī)學(xué)微生物學(xué)與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教程/全國(guó)高等院校醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)規(guī)劃教材》內(nèi)容不僅包括常用微生物學(xué)與免疫學(xué)技術(shù),同時(shí)涵蓋了部分分子生物學(xué)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,具有簡(jiǎn)明扼要、思路清晰、操作性強(qiáng)等特點(diǎn)。
《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教程/全國(guó)高等院校醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)規(guī)劃教材》可供基礎(chǔ)、臨床、預(yù)防口腔,護(hù)理等專業(yè)及醫(yī)學(xué)相關(guān)專業(yè)學(xué)生參考使用。
前言
第一篇 醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
第一章 醫(yī)學(xué)微生物學(xué)常用技術(shù)
第一節(jié) 顯微鏡的使用
第二節(jié) 細(xì)菌的基本形態(tài)及細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)
第三節(jié) 細(xì)菌不染色檢查法
第四節(jié) 細(xì)菌涂片的制備
第五節(jié) 簡(jiǎn)單染色法
第六節(jié) 革蘭染色法
第七節(jié) 細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)的檢查
第八節(jié) 細(xì)菌大小的測(cè)定
第九節(jié) 微生物計(jì)數(shù)
第二章 細(xì)菌的培養(yǎng)與保存方法
第一節(jié) 培養(yǎng)基的制備
第二節(jié) 細(xì)菌的分離與培養(yǎng)
第三節(jié) 細(xì)菌的傾注培養(yǎng)和平板菌落計(jì)數(shù)
第四節(jié) 細(xì)菌生長(zhǎng)曲線的繪制
第五節(jié) 微生物菌種保藏方法
第三章 細(xì)菌的分布、代謝及影響因素
第一節(jié) 細(xì)菌的分布
第二節(jié) 細(xì)菌的生化反應(yīng)
第三節(jié) 外界因素對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)代謝影響
第四節(jié) 細(xì)菌耐藥性的檢測(cè)
第五節(jié) 噬菌體的特異性溶菌試驗(yàn)
第四章 細(xì)菌的遺傳變異
第一節(jié) 細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型變異(L型變異)
第二節(jié) 鞭毛變異(H-O變異)
第三節(jié) 光滑型與粗糙型(S-R)菌落變異
第四節(jié) 細(xì)菌的R質(zhì)粒結(jié)合傳遞
第五節(jié) 質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化試驗(yàn)
第六節(jié) 細(xì)菌耐藥性突變
第五章 細(xì)菌的致病作用
第一節(jié) 透明質(zhì)酸酶擴(kuò)散試驗(yàn)
第二節(jié) 外毒素對(duì)機(jī)體的毒性作用及抗毒素的中和作用
第三節(jié) 內(nèi)毒素檢測(cè)(鱟試驗(yàn))
第四節(jié) 內(nèi)毒素的致熱作用(家兔發(fā)熱試驗(yàn))
第五節(jié) 大腸埃希菌腸毒素試驗(yàn)
第六節(jié) 莢膜的致病作用(肺炎雙球菌小鼠毒力試驗(yàn))
第六章 病原性球菌
第一節(jié) 病原性球菌的形態(tài)觀察
第二節(jié) 病原性球菌血平板培養(yǎng)物的觀察
第三節(jié) 膿汁標(biāo)本的分離與鑒定
第四節(jié) 血漿凝固酶試驗(yàn)
第五節(jié) 細(xì)菌的觸酶試驗(yàn)
第六節(jié) 內(nèi)酰胺酶的檢測(cè)
第七節(jié) 耐熱核酸酶試驗(yàn)
第八節(jié) 葡萄球菌糖發(fā)酵試驗(yàn)
第九節(jié) 桿菌肽敏感試驗(yàn)
第十節(jié) 抗鏈球菌溶血素“O”抗體測(cè)定
第十一節(jié) 肺炎鏈球菌膽汁溶解試驗(yàn)
第十二節(jié) 肺炎雙球菌小鼠毒力試驗(yàn)
第七章 腸道桿菌
第一節(jié) 糞便標(biāo)本中腸道病原菌分離
第二節(jié) 糞便標(biāo)本中腸道病原菌初步鑒定
第三節(jié) 腸道菌生化反應(yīng)
第四節(jié) 血清學(xué)鑒定
第八章 結(jié)核桿菌
第一節(jié) 結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)
第二節(jié) 抗酸染色法
第三節(jié) 熒光素染色法
第四節(jié) 人體結(jié)核菌素試驗(yàn)
第五節(jié) 結(jié)核分枝桿菌毒力試驗(yàn)
第二篇 醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)
第一章 免疫學(xué)常用技術(shù)
第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的基本操作技術(shù)
第二節(jié) 小鼠免疫器官解剖學(xué)觀察
第三節(jié) 外周血單核細(xì)胞的分離
第四節(jié) T細(xì)胞、B細(xì)胞分離技術(shù)
第五節(jié) 人外周血單核細(xì)胞來(lái)源樹(shù)突狀細(xì)胞的制備
第六節(jié) 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的分離
第七節(jié) 小鼠脾細(xì)胞的制備
第八節(jié) 抗原的制備
第九節(jié) 免疫血清的制備及效價(jià)的測(cè)定
第十節(jié) 抗體純化技術(shù)
第十一節(jié) 醛化紅細(xì)胞的制備
第十二節(jié) 免疫實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物模型的制備
第二章 非特異性免疫功能檢測(cè)
第一節(jié) 小鼠血腦屏障觀察
第二節(jié) 溶菌酶的溶菌作用
第三節(jié) 碳粒廓清實(shí)驗(yàn)
第四節(jié) 中性粒細(xì)胞吞噬功能的測(cè)定(小吞噬)
第五節(jié) 墨汁吞噬試驗(yàn)
第六節(jié) 中性粒細(xì)胞殺傷功能測(cè)定
第七節(jié) 巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(大吞噬)
第八節(jié) 中性粒細(xì)胞移動(dòng)功能檢測(cè)
第九節(jié) NK細(xì)胞活性測(cè)定
第十節(jié) 補(bǔ)體溶血試驗(yàn)
第十一節(jié) 血清總補(bǔ)體活性測(cè)定(CH50單位測(cè)定)
第三章 特異性體液免疫功能檢測(cè)
第一節(jié) 凝集反應(yīng)
第二節(jié) 沉淀反應(yīng)
第三節(jié) 血清溶血素測(cè)定
第四節(jié) 體外抗體形成細(xì)胞測(cè)定
第五節(jié) 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)
第六節(jié) 中和實(shí)驗(yàn)
第四章 特異性細(xì)胞免疫功能檢測(cè)
第一節(jié) 淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)
第二節(jié) 花環(huán)法T細(xì)胞CD2分子的檢測(cè)
第三節(jié) 白細(xì)胞移動(dòng)抑制試驗(yàn)
第四節(jié) 混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)
第五節(jié) 脾臟B細(xì)胞增殖試驗(yàn)
第六節(jié) CTL殺傷功能測(cè)定
第五章 免疫病理反應(yīng)
第一節(jié) 豚鼠速發(fā)型過(guò)敏反應(yīng)
第二節(jié) 青霉素過(guò)敏試驗(yàn)
第三節(jié) 免疫復(fù)合物型超敏反應(yīng)-Arthus現(xiàn)象
第四節(jié) 豚鼠結(jié)核菌素試驗(yàn)
第五節(jié) 小鼠DNFB試驗(yàn)
第六節(jié) 小鼠DTH試驗(yàn)
第七節(jié) 植物血凝素皮膚試驗(yàn)
第八節(jié) 鏈激酶-鏈道酶皮膚試驗(yàn)
參考文獻(xiàn)
附錄一 醫(yī)學(xué)微生物學(xué)與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室規(guī)則
附錄二 實(shí)驗(yàn)室常用器材的處理與消毒滅菌
附錄三 常用培養(yǎng)基的配制
附錄四 常用試劑的配制
《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教程/全國(guó)高等院校醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)規(guī)劃教材》:
(2)皮膚給藥:為了鑒定藥物或毒物經(jīng)皮膚的吸收作用、局部作用、致敏作用和光感作用等,均需采用經(jīng)皮膚給藥方法。如家兔和豚鼠常采用背部一定面積的皮膚脫毛后,將一定藥液涂在皮膚上,藥液經(jīng)皮膚吸收。
。3)脊髓腔內(nèi)給藥:此法主要用于椎管麻醉或抽取腦脊液。家兔椎管內(nèi)注射時(shí),先將家兔做自然俯臥式,盡量使其尾向腹側(cè)屈曲,用粗剪將第7腰椎周?chē)趁羧,?%碘酊消毒,干后再用79%乙醇溶液將碘酒擦去。在兔背部髕骨脊連線之中點(diǎn)稍下方摸到第7腰椎間隙(第7腰椎與第1骶骨椎之間),插入腰椎穿刺針頭。當(dāng)針到達(dá)椎管內(nèi)時(shí)(蛛網(wǎng)膜下隙),可見(jiàn)到兔的后肢跳動(dòng),即證明穿刺針頭已進(jìn)入椎管。這時(shí)不要再向下刺,以免損傷脊髓。固定好針頭,即可將藥物注入。
。4)小腦延髓池給藥:此種給藥都是在動(dòng)物麻醉情況下進(jìn)行的。而且常采用大動(dòng)物如狗等,小動(dòng)物很少采用。將狗麻醉后,使狗頭盡量向胸部屈曲,用左手摸到其第1頸椎上方的凹陷(枕骨大孔),固定位置,右手取7號(hào)鈍針頭(將針頭尖端麻鈍),由此凹陷的正中線上,順平行狗的方向,小心地刺人小腦延髓池。當(dāng)針頭正確刺入小腦延髓池時(shí),注射者會(huì)感到針頭再向前穿時(shí)無(wú)阻力,同時(shí)可以聽(tīng)到很輕的“咔嚓”一聲,即表示針頭已穿過(guò)硬腦膜進(jìn)入小腦延髓池,而且可抽出清亮的腦脊液,注射藥物前,先抽出一些腦脊液,抽取量根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要注入多少藥液決定,即注入多少抽取多少,以保持原來(lái)腦脊髓腔里的壓力。
。5)腦內(nèi)給藥:此法常用于微生物學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),將病原體等接種于被檢動(dòng)物腦內(nèi),然后觀察接種后的各種變化。小鼠腦內(nèi)給藥時(shí),選套有塑料管、針尖露出2mm深的5(1/2)針頭,由鼠正中額部刺入腦內(nèi),注入藥物或接種物。給豚鼠、兔、狗等進(jìn)行腦內(nèi)注射時(shí),須先用穿顱鋼針穿透顱骨,再用注射器針頭刺入腦部,再徐徐注入被檢物。注射速度一定要慢,避免引起顱內(nèi)壓急驟升高。
。6)直腸內(nèi)給藥:此種給藥方法常用于動(dòng)物麻醉。家兔直腸內(nèi)給藥時(shí),取灌腸用的膠皮管或用14號(hào)導(dǎo)尿管代替。在膠皮管或?qū)蚬茴^上涂上凡士林,由助手使兔蹲臥于桌上,以左臂及左腋輕輕按住兔頭及前肢,以左手拉住兔尾,露出肛門(mén),并用右手輕握后肢,實(shí)驗(yàn)者將橡皮管插入家兔肛門(mén)內(nèi),濃度為7~9cm,如為雌性動(dòng)物,注意勿誤插入陰道(肛門(mén)緊接尾根)。橡皮管插好后,將注射器與橡皮管套緊,即可灌注藥液。(7)關(guān)節(jié)腔內(nèi)給藥:此種方法常用于關(guān)節(jié)炎的動(dòng)物模型復(fù)制。兔給藥時(shí),將兔仰臥固定于兔固定臺(tái)上,剪去關(guān)節(jié)部被毛.用碘酒或乙醇溶液消毒,然后用手從下方和兩旁將關(guān)節(jié)固定,把皮膚稍移向一側(cè),在髕韌帶附著點(diǎn)處上方約0.5cm處進(jìn)針。針頭從上前方向下后方傾斜刺進(jìn),直至針頭遇阻力變小,然后針頭稍后退,以垂直方向推到關(guān)節(jié)腔中。針頭進(jìn)入關(guān)節(jié)腔時(shí),通?捎写唐票∧さ母杏X(jué),表示針頭已進(jìn)入膝關(guān)節(jié)腔內(nèi),即可注入藥液。
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