《全國(guó)高等院校醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)規(guī)劃教材:醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》嚴(yán)格遵循醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱的編寫要求。全書(shū)主要包含8部分,分別介紹了顯微鏡技術(shù)、細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和細(xì)胞器、細(xì)胞生理和細(xì)胞化學(xué)、綜合性實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞工程技術(shù)、細(xì)胞遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的原理與方法、細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與選題等方面的內(nèi)容。另外以附錄形式編寫了醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)的相關(guān)實(shí)驗(yàn),如人類某些性狀的調(diào)查分析、系譜分析、皮紋分析、遺傳病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)估計(jì)等內(nèi)容。
《全國(guó)高等院校醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)規(guī)劃教材:醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》適合高等醫(yī)學(xué)院校、醫(yī)藥院校及生物學(xué)相關(guān)專業(yè)的本科生、研究生等使用,也可供臨床檢驗(yàn)師和相關(guān)科研人員參考。
現(xiàn)代生命科學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)發(fā)展迅速,研究成果及相應(yīng)的新技術(shù)、新方法,精彩紛呈,令人有目不暇接之感,許多實(shí)驗(yàn)技術(shù)對(duì)現(xiàn)在與未來(lái)的生物醫(yī)學(xué),都正在或?qū)a(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響。
近年來(lái),隨著細(xì)胞生物學(xué)和遺傳學(xué)學(xué)科的迅速發(fā)展,教學(xué)內(nèi)容也隨之有了較多更新,細(xì)胞生物學(xué)和醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)作為基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)課程,列入高等院校臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)的教學(xué)計(jì)劃中,并開(kāi)設(shè)了實(shí)驗(yàn)課。為了提高教學(xué)水平,反映更具科學(xué)性、先進(jìn)性和實(shí)用性的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,編者根據(jù)教育部《臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)本科教學(xué)基本要求》和課程的設(shè)置,在參閱中外文獻(xiàn)和仔細(xì)分析我國(guó)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)課程教學(xué)現(xiàn)狀的基礎(chǔ)上,學(xué)習(xí)兄弟院校的教學(xué)經(jīng)驗(yàn)和信息資料,結(jié)合我們多年來(lái)教學(xué)科研的實(shí)踐體會(huì)和教學(xué)改革成果,編寫了《醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》一書(shū),供高等院校臨床醫(yī)學(xué)及其他醫(yī)學(xué)類專業(yè)學(xué)生使用,旨在加強(qiáng)學(xué)科的滲透交叉,減少實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的重復(fù),提高學(xué)生的實(shí)驗(yàn)技能。
根據(jù)教育部有關(guān)加強(qiáng)學(xué)生素質(zhì)教育和培養(yǎng)創(chuàng)新人才的要求,本實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)注重實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的更新,減少部分驗(yàn)證性或演示性實(shí)驗(yàn),開(kāi)設(shè)綜合性、設(shè)計(jì)性(探索性)實(shí)驗(yàn),在實(shí)驗(yàn)內(nèi)容上進(jìn)一步明確層次。將實(shí)驗(yàn)課分為:①基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn):著重培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力,分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力,培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度,以基本技能和基本操作為主。②綜合性實(shí)驗(yàn):綜合各學(xué)科的內(nèi)容,著重培養(yǎng)學(xué)生應(yīng)用新知識(shí)、新技術(shù)的能力和科學(xué)思維的能力。③設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)(或稱探索性實(shí)驗(yàn)):學(xué)生在教師的指導(dǎo)下進(jìn)行選題、查閱文獻(xiàn)資料、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)、獨(dú)立完成相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究、總結(jié)、最后完成論文,目的是初步培養(yǎng)學(xué)生科學(xué)研究的能力,為開(kāi)展科學(xué)研究和完成畢業(yè)論文打下基礎(chǔ)。本書(shū)強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)技能的訓(xùn)練和科學(xué)思維方法的培養(yǎng),并充分采用現(xiàn)代教育技術(shù)設(shè)備輔助實(shí)驗(yàn)課進(jìn)行教學(xué),提高學(xué)生的動(dòng)手能力和解決問(wèn)題的能力。考慮到各個(gè)院校所能開(kāi)設(shè)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容不同,同種試劑實(shí)驗(yàn)涉及2個(gè)以上實(shí)驗(yàn)內(nèi)容時(shí),為避免重復(fù)和方便查找,其配制方法列在書(shū)后的相應(yīng)附錄中。本書(shū)是一本實(shí)用性較強(qiáng)的細(xì)胞生物學(xué)與醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)教材,可作為不同實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)條件的綜合性大學(xué)醫(yī)學(xué)院和醫(yī)學(xué)院校的本科生及研究生使用,也可作為從事生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)和農(nóng)學(xué)工作人員的參考書(shū)。
……
第一章 顯微鏡技術(shù)
實(shí)驗(yàn)一 光學(xué)顯微鏡技術(shù)
一、普通光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用
二、特殊光學(xué)顯微鏡的原理、結(jié)構(gòu)與應(yīng)用
實(shí)驗(yàn)二 顯微攝影技術(shù)
一、照相顯微鏡各部件的選擇及應(yīng)用
二、感光片(膠卷)的選擇
三、濾光片的選擇
四、感光片的暗室加工
實(shí)驗(yàn)三 電子顯微鏡技術(shù)
一、透射電鏡的結(jié)構(gòu)和使用
二、掃描電鏡的結(jié)構(gòu)和使用
三、電鏡樣品制備技術(shù)和方法
四、電鏡樣品的觀察、識(shí)別和分析
第二章 細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)與細(xì)胞器
實(shí)驗(yàn)四 細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)與細(xì)胞器的觀察
一、細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察
二、細(xì)胞器的觀察
三、細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)
四、細(xì)胞的顯微測(cè)量
實(shí)驗(yàn)五 死活細(xì)胞的鑒別與分離
一、化學(xué)染色法鑒別死活細(xì)胞
二、熒光染色法鑒別死活細(xì)胞
三、死活細(xì)胞分離
實(shí)驗(yàn)六 細(xì)胞組分(細(xì)胞器)的分級(jí)分離
一、細(xì)胞核的分離提取
二、高速離心分離提取線粒體
第三章 細(xì)胞生理與細(xì)胞化學(xué)
實(shí)驗(yàn)七 細(xì)胞的生理活動(dòng)
一、細(xì)胞的吞噬活動(dòng)
二、草履蟲(chóng)纖毛運(yùn)動(dòng)及食物泡的形成
三、暗視野觀察細(xì)胞的纖毛和鞭毛運(yùn)動(dòng)
四、細(xì)胞膜的滲透性實(shí)驗(yàn)
五、細(xì)胞的凝集反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)八 細(xì)胞化學(xué)
一、普通細(xì)胞化學(xué)
二、酶細(xì)胞化學(xué)
三、熒光細(xì)胞化學(xué)
四、免疫細(xì)胞化學(xué)
第四章 綜合性實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)九 染色體標(biāo)本的制備及觀察
一、骨髓染色體標(biāo)本的制備及觀察
二、人類染色體標(biāo)本制備技術(shù)
三、其他組織細(xì)胞的染色體標(biāo)本制備
實(shí)驗(yàn)十 細(xì)胞增殖與細(xì)胞凋亡
一、有絲分裂標(biāo)本制備與觀察
二、減數(shù)分裂標(biāo)本制備與觀察
三、細(xì)胞凋亡的檢測(cè)
第五章 細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞工程技術(shù)
第一節(jié) 培養(yǎng)細(xì)胞的生存條件
一、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
二、細(xì)胞培養(yǎng)要求的環(huán)境
三、細(xì)胞培養(yǎng)基本設(shè)備和用品的功能簡(jiǎn)介
第二節(jié) 細(xì)胞培養(yǎng)的基本技術(shù)
第三節(jié) 體外培養(yǎng)細(xì)胞的取材方法與原代細(xì)胞培養(yǎng)
一、取材與細(xì)胞分散
二、原代細(xì)胞培養(yǎng)
三、傳代細(xì)胞培養(yǎng)
第四節(jié) 培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)特性與形態(tài)分型
一、培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)與增殖
二、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的觀察
第五節(jié) 培養(yǎng)細(xì)胞的計(jì)數(shù)、生長(zhǎng)曲線與分裂指數(shù)測(cè)定
第六節(jié) 培養(yǎng)細(xì)胞的凍存、復(fù)蘇與運(yùn)輸
一、影響凍存細(xì)胞活性的因素
二、培養(yǎng)物的運(yùn)輸
第七節(jié) 細(xì)胞系或細(xì)胞株的建立
實(shí)驗(yàn)十一 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)及相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)
一、實(shí)驗(yàn)室中無(wú)菌操作技術(shù)
二、細(xì)胞的原代培養(yǎng)技術(shù)
三、細(xì)胞的傳代培養(yǎng)技術(shù)
四、體外培養(yǎng)細(xì)胞的計(jì)數(shù)和活力測(cè)定
五、體外培養(yǎng)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇技術(shù)
實(shí)驗(yàn)十二 細(xì)胞融合與細(xì)胞核移植技術(shù)
一、細(xì)胞融合技術(shù)
二、細(xì)胞核移植技術(shù)
第六章 細(xì)胞遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)
第七章 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的原理與方法
第八章 細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與選題
參考文獻(xiàn)與網(wǎng)站
附錄Ⅰ 實(shí)驗(yàn)器械的清洗和處理
附錄Ⅱ 實(shí)驗(yàn)室常用滅菌和除菌方法
附錄Ⅲ 細(xì)胞生物學(xué)與遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)常用試劑的配制
附錄Ⅳ 常用培養(yǎng)基和抗生素的配制
附錄Ⅴ 離心機(jī)轉(zhuǎn)速與離心力的列線圖(換算)
附錄Ⅵ 流式細(xì)胞儀分析技術(shù)
附錄Ⅶ 生物樣品的儲(chǔ)存、郵送與實(shí)驗(yàn)室安全
附錄Ⅷ 常用生物學(xué)數(shù)據(jù)
附錄Ⅸ 實(shí)驗(yàn)常用軟件和數(shù)據(jù)庫(kù)介紹
附錄Ⅹ 有關(guān)細(xì)胞生物學(xué)和醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)的主要網(wǎng)站
附錄Ⅺ 人類某些遺傳性狀(疾病)的調(diào)查分析
附錄Ⅻ 系譜分析
附錄ⅩⅢ 皮紋分析
附錄ⅩⅣ 遺傳病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)估計(jì)
附錄ⅩⅤ 縮略語(yǔ)表
彩圖
一、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)細(xì)胞在體外所需的生存條件與體內(nèi)細(xì)胞基本相同。能進(jìn)入細(xì)胞被細(xì)胞利用和參與細(xì)胞代謝活動(dòng)的物質(zhì)為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。體外培養(yǎng)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)細(xì)胞者相同,主要有糖、氨基酸和維生素三大類。
培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中,有氧氧化和無(wú)氧酵解的強(qiáng)度都很大。六碳糖是主要的能源,也是合成某些氨基酸的原料,經(jīng)乙酰CoA可合成脂肪,經(jīng)糖酵解通路能合成核酸。
所有細(xì)胞都需要以下12種基本氨基酸:精氨酸、胱氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、色氨酸、組氨酸、酪氨酸和纈氨酸,這些都是細(xì)胞用以合成蛋白質(zhì)的原料。谷氨酰胺的特殊作用是能促進(jìn)各種氨基酸通過(guò)細(xì)胞膜,其中的氮是核酸中嘌呤和嘧啶的采源,也是合成三、二和一磷酸腺苷的所需物質(zhì)。
培養(yǎng)細(xì)胞也需要維生素,如生物素、葉酸、煙酰胺、泛酸、吡哆醇、核黃素、硫胺素以及維生素B12、維生素C等,這些維生素在很多常用的合成培養(yǎng)基中已成為組成成分。脂溶性維生素對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)也有作用,常從血清中得到補(bǔ)充。
除了基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外,細(xì)胞生長(zhǎng)還需要一些元素如鈉、鉀、鈣、鎂、氮和磷,以及一些微量元素如鐵、鋅、硒、銅和錳等,但均尚未明確所需的量,常從血清中得到。
細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)常由培養(yǎng)基供給。培養(yǎng)基的種類很多,按其物質(zhì)狀態(tài)分為半固體培養(yǎng)基(如軟瓊脂培養(yǎng)基)和液體培養(yǎng)基;按其來(lái)源,則分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基等。
1.合成培養(yǎng)基是根據(jù)已知細(xì)胞所需物質(zhì)的種類和數(shù)量嚴(yán)格配制而成的。由于成分清楚,故可通過(guò)改變或調(diào)節(jié)各種成分的種類、數(shù)量和比例,觀察細(xì)胞生物特性的反應(yīng)性變化、測(cè)知細(xì)胞與外界環(huán)境的關(guān)系、了解細(xì)胞生存條件、并可誘導(dǎo)細(xì)胞定向分化等。
2.天然培養(yǎng)基雖對(duì)細(xì)胞所需成分已基本掌握,但未完全搞清,在使用合成培養(yǎng)基時(shí),仍需要加入一些天然成分,如人或動(dòng)物的血清、血漿和胎汁等。當(dāng)前主要使用血清,以牛血清為主。血清的生物效應(yīng)早已證明,血清含有多種促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子及其他活性物質(zhì)等。合成培養(yǎng)基中不加血清也能維持細(xì)胞生存,但不能很好生長(zhǎng);加入5%的血清,對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō),能維持細(xì)胞不死和緩慢生長(zhǎng),一般需要加10%~20%。添加血清,雖利于細(xì)胞生長(zhǎng),但增加了不明成分,給分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)了困難。因此,人們正在探索不用血清的無(wú)血清培養(yǎng)法,并已取得了一定進(jìn)展。
……