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　　分子生物學的飛速發(fā)展已滲透到醫(yī)學研究和應用的各個領域，并派生出了一門全新的學科——分子醫(yī)學。分子醫(yī)學的出現(xiàn)猶如分子生物學對于生命科學之偉大意義，將全面更新傳統(tǒng)醫(yī)學的模式，并開拓出醫(yī)學發(fā)展的新潮流。所以，無論是正處于醫(yī)科學習階段的青年學生，還是已翱翔在醫(yī)學領域的廣大醫(yī)學工作者，對這一新型學科的領略或貫通已是勢在必行。

　　順應這一新的形勢，中山大學北校區(qū)在學校專項基金的投入下，建立了設備先進、設施完善的“分子醫(yī)學教學實驗室”，并對基礎醫(yī)學教育中一部分沿襲多年的實驗課程進行全新的綜合和改進，創(chuàng)建了一門集分子生物學基本技能和醫(yī)學應用于一體的全新的系統(tǒng)化實驗課程——分子醫(yī)學技能。本教材便是配合該新課程而編寫的。

　　分子醫(yī)學的主體內容是分子生物學在醫(yī)學中的應用，既涵蓋了其主要的理論和技術體系，又側重于醫(yī)學領域中的應用，其中的技術體系是開展該領域研究的核心內容。因其涉及面極其廣泛又錯綜復雜，眾多的技術原理和細節(jié)常常會令學子們迷惘而難以融會貫通。本書集編者多年從事醫(yī)學分子生物學教學和科研之經驗與教訓，力求以全面系統(tǒng)的框架、簡明扼要的文字、形象易懂的圖表，把分子醫(yī)學的基本輪廓和主要技術系統(tǒng)疏理成冊，奉獻于窳。全書共分七篇，以分子醫(yī)學概論為引導；第一篇為核酸技術；第二篇為蛋白質技術；第三篇和第四篇為免疫分析技術和細胞培養(yǎng)技術，是本書的主體內容，包括了分子生物學和分子免疫學中最實用的技術原理和操作細節(jié)，敘述詳盡，對從事相關實驗操作極有幫助；第五篇概述了近年出現(xiàn)的分子醫(yī)學前沿技術；第六篇簡要介紹了分子醫(yī)學技術在醫(yī)學中的應用；第七篇為分子醫(yī)學技術數(shù)據庫。

　　分子生物學的誕生被認為是第三次技術革命的標志之一，而分子醫(yī)學又將生物醫(yī)學推向了一個嶄新階段。愿本書能對大家在最短的時間內系統(tǒng)地掌握分子醫(yī)學這門前沿學科的基本理論和技能有所幫助，在不斷發(fā)展的醫(yī)學領域中具備更大的適應力和競爭力。

　　“分子醫(yī)學技能”課程的創(chuàng)建和本教材的編寫都是在中山大學各級管理部門的大力支持下完成的，尤其是實驗室與設備管理處林明河處長、基礎醫(yī)學院主管教學的吳忠道副院長；汪華僑教授一直以來關注并親自指導這一工作的進行，付出了大量心血；實驗教學中心潘實清主任、顏少平副主任、教學科朱敬歡科長、前期工作的林達老師和曹開源老師等，都為此付出了艱辛勞動；本實驗室的駱曉楓、黃小榮、謝金衛(wèi)等技師為本書的文字編輯和校對等做了大量工作。愿我們的沒有白費，愿這一新型課程的開展和新編教材的出版能為廣大學子的學習和工作提供有益的幫助，那將是我們所能得到的最有價值的報答！

前言

本書內容說明

分子醫(yī)學概論

1 疾病的分子機制

2 疾病的基因診斷

3 疾病的基因治療

4 疾病的基因預防

5 分子醫(yī)學技術

6 分子醫(yī)學的社會、倫理問題

7 分子醫(yī)學在現(xiàn)代醫(yī)學發(fā)展中的意義

7．1 分子醫(yī)學使臨床思維方式不斷更新

7．2 分子醫(yī)學促進實驗醫(yī)學和經驗醫(yī)學的融合

7．3 分子醫(yī)學加快了醫(yī)學教育的改革

主要參考文獻

第一篇 核酸技術

第1章 核酸制備與擴增

1．1 基因組DNA的提取與純化

1．1．1 原理

1．1．2 材料

1．1．3 實驗方案

1．1．4 常見問題及可能原因

1．2 RNA的提取和cDNA合成

1．2．1 原理

1．2．2 實驗方案

1．2．3 注意事項

1．3 聚合酶鏈反應（PCR）

1．3．1 PCR技術原理

1．3．2 材料

1．3．3 方案

1．3．4 注意事項

第2章 核酸的檢測

2．1 電泳分析法

2．1．1 原理

2．1．2 材料

2．1．3 DNA的瓊脂糖凝膠電泳的實驗方案

2．1．4 注意事項

2．1．5 結果討論

2．2 分光光度分析法

2．2．1 原理

2．2．2 紫外光譜分析法檢測DNA含量

2．2．3 分光光度法檢測RNA濃度

第3章 核酸雜交與核酸探針

3．1 概論

3．1．1 探針的種類

3．1．2 標記物的選擇

3．1．3 核酸探針標記的方法

3．1．4 幾種常見的雜交方法

3．2 核酸探針與雜交常規(guī)實驗

3．2．1 核酸探針的制備和標記

3．2．2 原位雜交法進行重組質粒的篩選

3．2．3 Southern雜交

3．2．4 Northern雜交

第4章 基因克隆

4．1 分離目的基因和基因載體

4．1．1 概論

4．1．2 目的基因的獲取

4．1．3 質粒制備的常規(guī)方案

4．2 限制性內切核酸酶切割目的基因和基因載體

4．2．1 概論

4．2．2 限制性內切核酸酶的酶切與鑒定

4．3 目的基因和基因載體的體外連接

4．3．1 概論

4．3．2 載體與目的基因的連接

4．4 重組DNA轉化宿主細胞

4．4．1 概論

4．4．2 重組DNA轉化大腸桿菌

4．5 重組體陽性克隆的篩選

4．5．1 概論

4．5．2 實驗方案

4．6 外源基因在宿主細胞中的表達

4．6．1 概論

4．6．2 在大腸桿菌中表達蛋白產物

主要參考文獻

第二篇 蛋白質技術

第5章 蛋白質樣品的制備技術

5．1 蛋白質樣品的預處理

5．2 細胞的破碎

5．2．1 機械方法

5．2．2 物理方法

5．2．3 化學及生物化學方法

5．3 蛋白質的提取

5．3．1 水溶液提取法

5．3．2 有機溶劑提取法

5．3．3 表面活性劑的利用

5．3．4 提取過程中的蛋白質保護

5．4 蛋白質的分離純化

5．4．1 根據蛋白質溶解度不同的分離方法

5．4．2 根據蛋白質分子質量大小不同的分離方法

5．4．3 根據蛋白質帶電性質進行分離

5．4．4 根據配體特異性的分離方法——親和層析法

5．5 蛋白質濃縮、干燥和保存

5．5．1 蛋白質的濃縮

5．5．2 蛋白質的干燥

5．5．3 蛋白質的儲存

第6章 蛋白質定量檢測技術

6．1 紫外（UV）吸收測定法

6．1．1 實驗原理

6．1．2 試劑和設備

6．1．3 操作方法

6．1．4 注意事項

6．2 Folin-酚試劑法（Lowry法）

6．2．1 基本原理

6．2．2 試劑和設備

6．2．3 操作步驟

62．4 注意事項

6．3 考馬斯亮藍法（Bradford檢測法）

6．3．1 基本原理

6．3．2 試劑與設備

6．3．3 操作步驟

6．3．4 注意事項

6．4 二喹啉甲酸（BCA）檢測法

6．4．1 基本原理

6．4．2 試劑與設備

64．3 操作步驟

64．4 注意事項

第7章 蛋白質SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳

7．1 聚丙烯酰胺凝膠的合成和結構

7．2 聚丙烯酰胺凝膠濃度和孔徑的選擇

7．3 不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠電泳的基本原理

7．4 實驗材料和試劑

7．5 實驗步驟

7．5．1 SDS-聚丙烯酰胺凝膠的灌制

7．6 膠的染色及處理

7．6．1 用考馬斯亮藍對SDS-聚丙烯酰胺凝膠進行染色

7．6．2 用銀鹽對SDS-聚丙烯酰胺凝膠進行染色

7．6．3 SDS-聚丙烯酰胺凝膠的干燥

7．7 注意事項

附：圓盤電泳

材料

操作

第8章 蛋白質的免疫印跡技術

8．1 蛋白質的SDS-聚丙烯酰胺電泳

8．2 蛋白質從凝膠轉移至膜上

8．2．1 基本原理

8．2．2 試劑與器材

8．2．3 操作步驟

8．2．4 注意事項

8．3 蛋白質轉移膜的免疫檢測

＆3．1 基本原理

8．3．2 試劑

8．3．3 操作步驟

8．4 免疫印跡后膜的重復使用

8．4．1 消除緩沖液（100ml）

8．4．2 操作步驟

8．5 免疫印跡中需要注意的問題

8．5．1 抗體的性質與使用

8．5．2 樣品中待檢測蛋白質的含量

8．5．3 背景問題

8．5．4 轉印效率低

8．5．5 設置對照與解釋結果

8．5．6 免疫印跡技術的靈敏度

第9章 蛋白質層析技術

9．1 層析的基本概念

9．2 層析的基本理論

9．3 層析法的分類

9．4 柱層析的基本裝置及基本操作

9．4．1 柱層析的基本裝置

9．4．2 柱層析的基本操作

9．5 幾種常見的蛋白質層析技術

9．5．1 凝膠層析

9．5．2 離子交換層析

9．5．3 親和層析

9．5．4 高效液相色譜法

附：實驗

實驗一 血清-球蛋白的分離純化（分子篩層析法）

實驗二 血清蛋白質的分離（離子交換層析法）

實驗三 凝膠層析法分離蛋白質

主要參考文獻

……

第三篇 免疫分析技術

第四篇 細胞培養(yǎng)技術

第五篇 分子醫(yī)學前沿技術

第六篇 分子醫(yī)學技術在醫(yī)學中的應用

第七篇 分子醫(yī)學技術數(shù)據庫