基因工程是一門實(shí)用性很強(qiáng)的學(xué)科，涉及生命科學(xué)的多學(xué)科領(lǐng)域。本書(shū)以用于檢測(cè)細(xì)胞凋亡的Annexin Ⅴ-EGFP為例，系統(tǒng)介紹了從基因克隆、蛋白質(zhì)表達(dá)純化、蛋白質(zhì)功能檢測(cè)到最后應(yīng)用方面的實(shí)驗(yàn)方法。
本書(shū)適用于初步接觸基因工程實(shí)驗(yàn)的高年級(jí)本科生，或從事相關(guān)研究的科研人員。
殷武編著的《基因工程實(shí)驗(yàn)(AnnexinV-EGFP重組蛋白質(zhì)的克隆表達(dá)與檢測(cè))》以具體的ANNEXINV-EGFP（ANNEXINV綠色熒光蛋白）為例系統(tǒng)介紹基因工程中從基因克隆、鑒定、表達(dá)與純化的一系列實(shí)驗(yàn)。讓學(xué)生對(duì)基因工程實(shí)驗(yàn)過(guò)程有更為系統(tǒng)與全面的認(rèn)識(shí)，激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)基因工程的興趣，并掌握基因工程中基本的知識(shí)與技能。
叢書(shū)序
叢書(shū)前言
第一章 Annexin Ⅴ-EGFP基因克隆與表達(dá)載體構(gòu)建
實(shí)驗(yàn)1 Annexin Ⅴ表達(dá)序列檢索
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>2.實(shí)驗(yàn)原理
3.實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果
實(shí)驗(yàn)2 Annexin Ⅴ-EGFP基因克隆設(shè)計(jì)
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>2.實(shí)驗(yàn)原理
3.實(shí)驗(yàn)方法
實(shí)驗(yàn)3 哺乳動(dòng)物細(xì)胞中提取RNA
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>2.實(shí)驗(yàn)原理(異硫氰酸胍酚氯仿一步法)
3.實(shí)驗(yàn)儀器與器材 叢書(shū)序
叢書(shū)前言
第一章 Annexin Ⅴ-EGFP基因克隆與表達(dá)載體構(gòu)建
實(shí)驗(yàn)1 Annexin Ⅴ表達(dá)序列檢索
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>2.實(shí)驗(yàn)原理
3.實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果
實(shí)驗(yàn)2 Annexin Ⅴ-EGFP基因克隆設(shè)計(jì)
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>2.實(shí)驗(yàn)原理
3.實(shí)驗(yàn)方法
實(shí)驗(yàn)3 哺乳動(dòng)物細(xì)胞中提取RNA
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>2.實(shí)驗(yàn)原理(異硫氰酸胍酚氯仿一步法)
3.實(shí)驗(yàn)儀器與器材
4.試劑與配制
5.實(shí)驗(yàn)步驟
6.實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與討論
7.思考題
實(shí)驗(yàn)4 逆轉(zhuǎn)錄PCR與產(chǎn)物鑒定
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>2.實(shí)驗(yàn)原理
3.實(shí)驗(yàn)方法
4.實(shí)驗(yàn)步驟
5.實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
實(shí)驗(yàn)5 PCR產(chǎn)物的酶切與克隆
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>2.實(shí)驗(yàn)原理
3.實(shí)驗(yàn)儀器與器材
4.試劑與配制
5.實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)6 克隆鑒定
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>2.實(shí)驗(yàn)原理
3.實(shí)驗(yàn)儀器與器材
4.試劑與配制
5.實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)7 大腸桿菌感受態(tài)的制備
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求
2.實(shí)驗(yàn)原理
3.實(shí)驗(yàn)儀器與器材
4.試劑與配制
5.實(shí)驗(yàn)步驟
參考文獻(xiàn)
第二章 Annexin Ⅴ-EGFP質(zhì)粒的擴(kuò)增與提取
實(shí)驗(yàn)8 Annexin Ⅴ-EGFP質(zhì)粒的擴(kuò)增
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>2.實(shí)驗(yàn)儀器與器材
3.試劑與配制
4.實(shí)驗(yàn)原理
5.實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)9 Annexin Ⅴ-EGFP質(zhì)粒的提取
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>2.實(shí)驗(yàn)原理與方法
3.實(shí)驗(yàn)儀器與器材
4.試劑與配制
5.實(shí)驗(yàn)步驟
6.質(zhì)粒提取常見(jiàn)問(wèn)題
參考文獻(xiàn)
第三章 Annexin Ⅴ-EGFP基因的表達(dá)與純化
實(shí)驗(yàn)10 Annexin Ⅴ-EGFP基因的表達(dá)
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>2.實(shí)驗(yàn)原理
3.實(shí)驗(yàn)儀器與器材
4.試劑與配制
5.實(shí)驗(yàn)步驟
6.注意事項(xiàng)
7.討論
8.思考題
實(shí)驗(yàn)11 Ni-NTA親和層析純化融合蛋白His6-EGFP-Annexin Ⅴ
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>2.實(shí)驗(yàn)原理
3.實(shí)驗(yàn)儀器與器材
4.試劑與配制
5.實(shí)驗(yàn)方法
6.注意事項(xiàng)
7.討論
8.思考題
參考文獻(xiàn)
第四章 Annexin Ⅴ-EGFP重組蛋白質(zhì)的應(yīng)用檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)12 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>2.實(shí)驗(yàn)原理
3.實(shí)驗(yàn)儀器與器材
4.試劑與配制
5.實(shí)驗(yàn)方法
6.注意事項(xiàng)
7.討論
8.思考題
實(shí)驗(yàn)13 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移印跡法檢測(cè)Annexin Ⅴ-EGFP基因表達(dá)
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>2.實(shí)驗(yàn)原理
3.實(shí)驗(yàn)試劑
4.實(shí)驗(yàn)儀器
5.實(shí)驗(yàn)步驟
6.注意事項(xiàng)
7.討論
8.思考題
實(shí)驗(yàn)14 流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡細(xì)胞
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>2.實(shí)驗(yàn)原理
3.實(shí)驗(yàn)試劑
4.實(shí)驗(yàn)儀器
5.實(shí)驗(yàn)步驟
6.注意事項(xiàng)
7.擴(kuò)展
8.思考題
實(shí)驗(yàn)15 熒光顯微鏡檢測(cè)
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>2.實(shí)驗(yàn)原理
3.實(shí)驗(yàn)試劑
4.實(shí)驗(yàn)儀器
5.實(shí)驗(yàn)步驟
6.注意事項(xiàng)
7.擴(kuò)展
8.思考題
參考文獻(xiàn)
附錄
1.氨基酸密碼子表
2.酶切位點(diǎn)保護(hù)堿基表
3.SDS-PAGE分離膠配方表
4.SDS-PAGE濃縮膠配方表
5.網(wǎng)絡(luò)資源
新書(shū)資訊