《生物技術綜合實驗簡明教程》介紹了生物技術常用儀器設備的使用、生物技術相關實驗原理及操作,精選了21個實驗,涵蓋核酸、蛋白質的提取與分離,電泳技術,PCR技術,免疫組織化學技術,原核表達及純化,免疫印跡等內容。在附錄中收集了常用的生物技術實驗所涉及的緩沖液、試劑配方以及常用的原核表達載體信息,方便讀者進行查閱。
適讀人群 :本書可以作為農林、綜合、師范等高等院校生物及相關專業的教材或教學參考書,也可供生物技術領域的專業技術人員使用和參考。
在生物技術實驗的基礎上,《生物技術綜合實驗簡明教程》介紹了高效液相色譜技術在水產品中抗生素殘留方面的應用以及魚類細胞原代培養技術。《生物技術綜合實驗簡明教程》可供農林、綜合、師范等高等院校生物及相關專業教學使用,也可供生物技術專業人員尤其是水產行業人員參考。
生物技術是21世紀最具發展前景和活力的學科,在農業、醫學等領域的應用日益廣泛。本書以現代生物技術理論及實驗為主線,分兩章介紹了生物技術常用儀器設備的使用、生物技術相關實驗原理及操作。全書共21個實驗,涵蓋了核酸、蛋白質的提取與分離、電泳技術、PCR技術、免疫組織化學技術、原核表達及純化、免疫印跡等內容。同時,本書在生物技術實驗的基礎上,介紹了高效液相色譜技術在水產品中抗生素殘留方面的應用以及魚類細胞原代培養技術。在本書的附錄中收集了常用的生物技術實驗所涉及的緩沖液、試劑配方以及常用的原核表達載體信息,方便讀者進行查閱。本書力求文章簡潔,盡量以圖片的形式展示生物專業相關實驗的操作及原理。同時,本書注重實用性,優化實驗步驟及方法,可以幫助學生掌握生物技術相關的基本實驗原理和基本操作技能,使學生在分析問題和解決問題方面受到嚴格的訓練,以培養高素質應用型生物技術人才。
本書由齊志濤主編,齊志濤、王資生、喬幗、張啟煥編寫。
本書出版得到鹽城工學院校級教材出版基金資助。
由于編者水平的限制和時間倉促等方面的問題,本書還存在很多需要改進的地方,希望各位讀者對本書的不足之處予以批評指正。
編者
2017年9月
齊志濤,鹽城工學院,畢業于中國科學院水生生物研究所。主要從事水產動物免疫與分子生物學方面的教學與科研工作。主持國家自然科學基金、江蘇省自然科學基金等多項項目。承擔了生物化學、生物技術綜合實驗、專業英語與論文寫作等課程。
第一章緒論
第一節常用儀器設備的使用1
一、離心機1
二、移液管2
三、移液器4
四、高壓滅菌鍋6
五、PCR儀的使用7
六、超凈工作臺9
七、紫外-可見分光光度計10
第二節生物實驗室個人防護12
第二章生物技術實驗
實驗一CTAB法提取植物DNA13
實驗二動物組織DNA的提取15
實驗三動物組織總RNA的提取17
實驗四質粒DNA的提取19
實驗五DNA的瓊脂糖凝膠電泳21
實驗六質粒的雙酶切鑒定25
實驗七感受態的制備及外源DNA轉化28
實驗八cDNA的合成31
實驗九PCR技術——β-actin基因中間片段的克隆32
實驗十動物組織蛋白質的提取33
實驗十一BCA法測定動物組織蛋白質濃度34
實驗十二考馬斯亮藍法測定動物組織蛋白質濃度36
實驗十三蛋白質的SDS-PAGE分析37
實驗十四多克隆抗體的制備42
實驗十五免疫組織化學技術45
實驗十六原位雜交技術49
實驗十七原核表達54
實驗十八原核表達蛋白的純化56
實驗十九免疫印跡(Western Blot)58
實驗二十水產品中恩諾沙星殘留量的測定——高效液相色譜法60
實驗二十一魚類細胞原代培養61
一、實驗室常規試劑配制方法64
二、常用原核表達載體結構及序列73
參考文獻
附錄