本書重點(diǎn)介紹了適合高等院校相關(guān)工科專業(yè)學(xué)習(xí)的基礎(chǔ)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn),并適當(dāng)介紹了部分分子生物學(xué)及基因工程的常用實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。全書共四章,包括前言、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本原理、33個生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)和附錄,教學(xué)實(shí)驗(yàn)部分包括實(shí)驗(yàn)的目的、原理和基本操作方法,并在各教學(xué)實(shí)驗(yàn)中附有思考題,以便于進(jìn)一步理解實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容。
本書主要適用于工科高等院校中與生物相關(guān)的非生物類專業(yè)本科生和研究生的生化實(shí)驗(yàn)課教材,也可作為從事生物技術(shù)科學(xué)研究和教學(xué)的科技人員和教育工作者的參考書。
第一章 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本要求
第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性
一、系統(tǒng)誤差
二、偶然誤差
三、過失錯誤
第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)記錄及報告
一、實(shí)驗(yàn)記錄
二、實(shí)驗(yàn)報告
第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)樣品的制備
一、動物的臟器
二、微生物
三、細(xì)胞
第二章 常見的實(shí)驗(yàn)方法及基本原理
第一節(jié) 透析
第二節(jié) 沉淀
一、蛋白質(zhì)的特性
二、常用的蛋白質(zhì)沉淀方法
第三節(jié) 層析
一、層析原理
二、幾種常見的層析法
第四節(jié) 電泳
一、電泳法的基本原理
二、幾種常用電泳法簡介
第五節(jié) 分光光度法
一、基本原理
二、比色法
三、分光光度法
四、濁度法
第六節(jié) 離心
第七節(jié) 常用的蛋白質(zhì)現(xiàn)代分析法
一、熒光分光光度法
二、旋光色散與圓二色性法
三、核磁共振波譜法
第三章 普通實(shí)驗(yàn)
第四章 綜合實(shí)驗(yàn)
附錄
參考文獻(xiàn)
第一蕈生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本要求
第一節(jié)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性
生化實(shí)驗(yàn)是以活的生命體為對象,對生物體內(nèi)存在的主要大分子物質(zhì),如糖、脂肪、蛋白質(zhì)、核酸、酶等進(jìn)行定性或定量的分析測定。定性分析是確定存在物質(zhì)的種類,或粗略計算物質(zhì)所占的比例;而定量分析則需確定物質(zhì)的精確含量。因此研究者要根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析和總結(jié),要善于分析和判斷結(jié)果的準(zhǔn)確性,認(rèn)真查找可能出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)誤差的原因,并進(jìn)一步研究減少誤差的辦法,不斷提高所得結(jié)果的準(zhǔn)確度。
一般在實(shí)驗(yàn)測量過程中必然會有誤差產(chǎn)生,但如果懂得這些誤差的可能來源,多數(shù)的誤差可以通過適當(dāng)?shù)奶幚韥硇U?br />
產(chǎn)生誤差的原因很多,一般根據(jù)誤差的性質(zhì)和來源來區(qū)分。
一、系統(tǒng)誤差
系統(tǒng)誤差是指在測量過程中某些經(jīng)常發(fā)生的原因所造成的誤差。它對分析結(jié)
果的影響比較穩(wěn)定,常在重復(fù)實(shí)驗(yàn)時重復(fù)出現(xiàn),使測定結(jié)果系統(tǒng)偏高或偏低。
1.系統(tǒng)誤差的來源
①方法誤差如用濾紙稱量易潮解的藥品;做生物實(shí)驗(yàn)特別是酶的實(shí)驗(yàn)時沒有考慮溫度的影響等。
②儀器誤差如量取液體時,按燒杯的指示線量取液體往往準(zhǔn)確度降低,需要用量筒量取;在配置標(biāo)準(zhǔn)溶液時量筒同樣不夠精確,要選用等體積的容量瓶定容至刻度線;不同的天平精度差別很大,如果需要稱量’lO09以上的物體,使用托盤天平即可;但如稱量l9的樣品,選用扭力天平比較方便;稱量lOm9以內(nèi)的樣品則必須使用感量為萬分之一克的分析天平或電子天平稱取。
③試劑誤差如試劑不純或蒸餾水不合格,引入微量元素或?qū)y定有干擾的雜質(zhì),就會造成一定的誤差。
④習(xí)慣誤差如在使用移液管量取液體時,由于個人的操作手法不同,可能會存在一定的習(xí)慣誤差。特別是在讀數(shù)據(jù)時,目光是否平視,視線與液體彎月面是否相切,都可成為生化實(shí)驗(yàn)中造成較大誤差的原因。