本書是為生物化學理論學習編寫的配套實驗教材。內容分為生物化學實驗技術原理(上篇)、生物化學實驗方法(下篇)和附錄三部分。上篇介紹生物化學實驗技術的基本原理,包括生物化學實驗樣品制備技術、電泳技術、離心技術、層析技術、光譜分析技術、標記分析技術和其他分離純化技術,共7章。下篇提供了常用的生物化學實驗方法,包括糖類化學、脂類化學、蛋白質化學、核酸化學、酶化學、維生素、新陳代謝、免疫化學50個實驗項目和2個綜合實驗項目。附錄介紹了生物化學實驗室規則、安全及防護知識,常用儀器的使用方法,常用緩沖液的配制和酸堿指示劑等內容。
該教材所選的實驗方法均為編者多年來在教學和科研中反復驗證過的比較成熟的實驗方法,可供高等院校農業和生命科學領域等各類相關專業的本科生實驗課程選擇使用,也可以為研究生的科研提供幫助。
第三版前言
第一版前言
第二版前言
上篇 生物化學實驗技術原理
第一章 生物化學實驗樣品制備技術
第一節 植物樣品的制備
一、植株組織樣品的制備
二、籽粒樣品的制備
三、瓜果樣品的制備
四、丙酮干粉的制備
第二節 動物樣品的制備
一、血液樣品的制備
二、組織樣品的制備
三、尿液樣品的制備
第三節 微生物樣品的制備
一、微生物細胞的收集
二、干細胞制劑的制備
三、細胞的破碎
第二章 電泳技術
第一節 基本原理
一、基本概念
二、電泳系統的組成
三、電泳技術的分類
四、電泳分析的基本原理
第二節 常用支持介質在電泳中的應用
一、醋酸纖維素薄膜
二、瓊脂糖凝膠
三、聚丙烯酰胺凝膠
第三節 幾種常用的電泳技術
一、十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳
二、梯度凝膠電泳
三、等電聚焦電泳
四、雙向電泳
五、毛細管電泳
第三章 離心技術
第一節 基本原理
一、離心力
二、沉降系數
第二節 離心機的種類和基本結構
一、種類
二、基本結構
三、分析型超速離心機
第三節 制備超離心法
一、差速離心法
二、密度梯度離心法
第四章 層析技術
第一節 層析技術的原理和分類
一、層析技術的原理
二、層析技術的分類
三、常用柱層析參數
第二節 幾種常用的層析法
一、分配層析
二、凝膠層析
三、親和層析
四、離子交換層析
五、吸附層析
六、高效液相色譜
七、氣相色譜
第五章 光譜分析技術
第一節 基本原理
第二節 可見及紫外吸收光譜分析
一、可見及紫外分光光度計
二、常用的可見及紫外吸收光譜分析方法
三、影響可見及紫外吸收光譜分析的因素
第三節 熒光發射光譜分析
一、熒光分光光度計
二、常用的熒光分析方法
三、影響熒光分析的因素
四、熒光分析的應用
第六章 標記分析技術
第一節 同位素標記分析技術
一、同位素的種類及其特性
二、同位素標記分析技術的類型和方法
三、常用的同位素標記分析技術
四、同位素標記的檢測方法
五、核輻射的安全防護
第二節 發光標記分析技術
一、基本原理
二、熒光標記類型
三、化學發光標記類型
四、發光標記分析及檢測方法
第三節 酶標記分析技術
一、辣根過氧化物酶
二、堿性磷酸酶
三、葡萄糖氧化酶
第四節 免疫標記分析技術
一、免疫學理論基礎
二、免疫標記分析技術的分類
三、常用免疫標記分析技術
第五節 膠體金標記分析技術
一、膠體金的制備
二、膠體金的標記
三、膠體金標記分析技術
四、膠體金標記的檢測
第七章 其他分離純化技術
第一節 沉析技術
一、鹽析
二、等電點沉淀
三、有機溶劑沉淀
四、結晶
第二節 濾分技術
一、微濾
二、超濾
二、反滲透
四、納濾
第三節 萃取技術
一、基本原理
二、萃取技術分類
三、常用萃取技術
第四節 濃縮和干燥技術
一、濃縮技術
二、干燥技術
下篇 生物化學實驗方法
第八章 糖類化學
實驗1 可溶性糖的定量測定
方法一 蒽酮法
方法二 苯酚-硫酸法
實驗2 還原糖和總糖的測定——3,5-二硝基水楊酸比色法
實驗3 血糖的定量測定
方法一 葡萄糖氧化酶法
方法二 鄰甲苯胺法
實驗4 直鏈淀粉和支鏈淀粉含量的測定——碘比色法
實驗5 可溶性糖的硅膠G薄層層析
第九章 脂類化學
實驗6 粗脂肪的提取和定量測定——索氏抽提法
實驗7 血清三酰甘油含量的測定
實驗8 血清總膽固醇含量的測定
方法一 磷硫鐵法
方法二 鄰苯二甲醛法
實驗9 酮體的生成與利用
第十章 蛋白質化學
實驗10 紙層析法分離鑒定氨基酸
實驗11 谷物種子中賴氨酸含量的測定
實驗12 種子蛋白的氨基酸組分分析——氨基酸自動分析儀法
實驗13 谷物種子蛋白質組分的分離提取
實驗14 蛋白質的兩性解離性質和酪蛋白等電點的測定
實驗15 血紅蛋白的兩性解離
實驗16 蛋白質含量測定
方法一 凱氏定氮法
方法二 Folin-酚法
方法三 考馬斯亮藍G-250法
方法四 BCA法
實驗17 蛋白質相對分子質量測定
方法一 凝膠過濾法
方法二 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法
實驗18 血清蛋白醋酸